黃曲霉素毒素不僅污染了很多重要的食品和飼料,還使中藥材也身陷“毒”中,這該讓我們?nèi)绾稳肟凇P(guān)于黃曲霉毒素,你知道多少?跟隨小編,說說黃曲霉毒素的那些事兒。
---簡介黃曲霉毒素
黃曲霉毒素(Aflatoxin,?AFT)是由黃曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Aspergillus parasiticus)代謝產(chǎn)生的一組大約20種化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的化合物組成。寄生曲霉主要以寄生方式存在于水蠟蟲體內(nèi),這種動物能對熱帶和亞熱帶地區(qū)甘蔗或葡萄造成危害,不過它在我國并不常見。
黃曲霉毒素盡管種類繁多,但通常都是由一個雙氫呋喃環(huán)和一個氧雜萘鄰?fù)ㄓ置愣顾兀榛窘Y(jié)構(gòu)單位構(gòu)成,前者為其毒性結(jié)構(gòu),后者可能與其致癌作用有關(guān)。根據(jù)其分子結(jié)構(gòu)與感染方式的不同,天然產(chǎn)生的黃曲霉毒素分為B1、B2、G1、G2,?B2和G2是母體化合物的雙氫衍生物。后來人們又在奶中分離到黃曲霉毒素的另外兩種衍生物即:M1和M2。除此之外,人們還分離到了多種黃曲霉毒素的代謝產(chǎn)物、異構(gòu)物和類似物,如P1、Q1、B2a、G2a等。
AFT是一類在紫外光的照射之下能發(fā)出強烈特殊熒光的物質(zhì),G和B是根據(jù)毒素分別在紫外光下發(fā)出綠色熒光(Green)和藍色熒光(Blue)來命名的,M 則是由于它最早發(fā)現(xiàn)于奶(Milk)中。
毒力試驗證明,B1毒性最強是目前發(fā)現(xiàn)的真菌類毒素中毒性最大、污染范圍最廣泛的毒素之一,1993年世界衛(wèi)生組織(IARC)的癌癥研究機構(gòu)將其劃定為I類致癌物,而另外三種黃曲霉毒素B2、G1、G2先后也被劃分為2B類致癌物。
AFT不僅廣泛污染許多重要的食品商品,如谷物、糧油、堅果等農(nóng)作物及各種飼料,還能夠污染各種中藥材。產(chǎn)AFT的真菌廣泛存在于空氣、土壤中,中藥材在種植、加工、貯藏等各個環(huán)節(jié)都有可能污染產(chǎn)毒真菌。據(jù)報道,如神曲、淡豆豉、陳皮、麥冬、當歸、山藥、山茱萸、杏仁、薏苡、胖大海等藥材,可以認為其污染的可能性較大。2015版《中國藥典》對收載的柏子仁、蓮子、使君子、檳榔、麥芽、肉豆蔻、決明子、遠志、薏苡仁、大棗、地龍、蜈蚣、水蛭、全蝎等14味藥材及其飲片品種項下增加“黃曲霉毒素”檢查項目,限度為“黃曲霉毒素B1不得過5μg/kg;黃曲霉毒素G2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素B2總量不得過10μg/kg”。
AFT最適合生長在高溫高濕的條件下,溫度在24~28℃之間,相對濕度在80%以上,黃曲霉菌產(chǎn)毒量最高。故南方及溫濕地區(qū)在春夏兩季易發(fā)生AFT中毒,?有的作物甚至在收獲前或收獲期就可能被AFT污染。
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---檢測方法:由于黃曲霉毒素的危害及分布的廣泛性,世界各國非常重視食品和飼料中黃曲霉毒素的含量問題,并確定了食品中黃曲霉毒素的最高允許含量。
世界各國及地區(qū)對食品中黃曲霉毒素的最高允許含量
國家及地區(qū) | 黃曲霉毒素種類 | 最高允許含量μg/kg |
國際食品法典(CAC) | B1+B2+G1+G2 | 15 |
美國 | B1+B2+G1+G2 | 15 |
歐盟 | B1(B1+B2+G1+G2) | 2(4) |
阿根廷 | B1(B1+B2+G1+G2) | 5(20) |
澳大利亞 | B1+B2+G1+G2 | 15 |
巴西 | B1(B1+B2+G1+G2) | 5(10) |
中國 | B1 | 5~20 |
中國香港 | B1+B2+G1+G2 | 20 |
中國臺灣 | B1+B2+G1+G2 | 15 |
日本 | B1 | 10 |
加拿大 | B1+B2+G1+G2 | 15 |
芬蘭 | B1+B2+G1+G2 | 5 |
哥倫比亞 | B1+B2+G1+G2 | 20 |
墨西哥 | B1+B2+G1+G2 | 20 |
挪威 | B1+B2+G1+G2 | 5 |
俄羅斯 | B1 | 5 |
新加坡 | B1(B1+B2+G1+G2) | 0(0) |
印度 | B1 | 30 |
以色列 | B1(B1+B2+G1+G2) | 5(15) |
丹麥 | B1(B1+B2+G1+G2) | 2(4) |
捷克 | B1(B1+B2+G1+G2) | 5(10) |
根據(jù)各國對食品中黃曲霉毒素最高允許含量的不同,加之近年來限量標準有明顯的提高,同時為了促進進出口貿(mào)易的發(fā)展,各國對黃曲霉毒素的檢測方法有了更高的要求。近年來國內(nèi)外常用的黃曲霉毒素檢測方法整理如下:
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? 黃曲霉毒素檢測方法 | 前處理 | ? 檢測原理 |
提取 | 凈化與富集 |
薄層色譜法TLC | 甲醇-水、氯仿-水、乙腈-水提取系統(tǒng) | 固相萃取SPE(硅膠、C18、交聯(lián)有抗體的免疫親和柱IAC等)、多功能凈化柱(MFC) | 展開后,在365nm紫外燈下,AFB1、AFB2、G1、G2分別顯紫色、藍紫色、綠色、綠色熒光 |
| 柱后碘衍生化熒光檢測 |
高效液相色譜法HPLC | 柱后過溴化溴化吡啶(PBPB)衍生化熒光檢測 |
HPLC-MS |
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酶聯(lián)免疫測定法ELISA | 試樣中的AFB1經(jīng)提取、脫脂、濃縮后與定量特異性抗體反應(yīng),多余的游離抗體則與酶標板內(nèi)的包被抗原結(jié)合,加入酶標記物和底物后顯色,與標準比較測定含量 |
溴化熒光分光光度法SFB | 溴試劑衍生化后,立即放入熒光檢測計中檢測 |
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根據(jù)各國對食品中黃曲霉毒素最高允許含量的不同,加之近年來限量標準有明顯的提高,同時為了促進進出口貿(mào)易的發(fā)展,各國對黃曲霉毒素的檢測方法有了更高的要求。近年來國內(nèi)外常用的黃曲霉毒素檢測方法整理如下:
? 黃曲霉毒素檢測方法 | 前處理 | ? 檢測原理 |
提取 | 凈化與富集 |
薄層色譜法TLC | 甲醇-水、氯仿-水、乙腈-水提取系統(tǒng) | 固相萃取SPE(硅膠、C18、交聯(lián)有抗體的免疫親和柱IAC等)、多功能凈化柱(MFC) | 展開后,在365nm紫外燈下,AFB1、AFB2、G1、G2分別顯紫色、藍紫色、綠色、綠色熒光 |
| 柱后碘衍生化熒光檢測 |
高效液相色譜法HPLC | 柱后過溴化溴化吡啶(PBPB)衍生化熒光檢測 |
HPLC-MS |
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酶聯(lián)免疫測定法ELISA | 試樣中的AFB1經(jīng)提取、脫脂、濃縮后與定量特異性抗體反應(yīng),多余的游離抗體則與酶標板內(nèi)的包被抗原結(jié)合,加入酶標記物和底物后顯色,與標準比較測定含量 |
溴化熒光分光光度法SFB | 溴試劑衍生化后,立即放入熒光檢測計中檢測 |
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